行測常識判斷考點范圍很廣，一般包括政治、法律、經(jīng)濟、人文、地理、科技、生活等方面，需要小伙伴們長時間不間斷的積累。今天河北公務員考試網(wǎng)（www.follwo-marketing.com）給大家?guī)淼某ＷR相關考點是“生物基因工程”。

 

　　基因工程是指按照人們的愿望，進行嚴格的設計，通過體外DNA重組和轉基因技術，賦予生物以新的遺傳特性，創(chuàng)造出更符合人們需要的新的生物類型和生物產(chǎn)品?；蚬こ淌窃贒NA分子水平上進行設計和施工的，又叫做DNA重組技術。

 

　　操作水平：DNA分子水平

 

　　原理：基因重組

 

　　優(yōu)點：1.突破物種界限。 2.定向改造生物的遺傳特性。

 

　?。ㄒ唬┗蚬こ痰幕竟ぞ?/p>

 

　　1.“分子手術刀”——限制性核酸內切酶（限制酶）

 

　?。?）來源：主要是從原核生物中分離純化出來的。

 

　　（2）功能：能夠識別特定的核苷酸序列，并在特定的切點切割，因此具有專一性。

 

　?。?）作用的化學鍵：切割磷酸二酯鍵。

 

　　(4)結果：經(jīng)限制酶切割產(chǎn)生的DNA片段末端通常有兩種形式：黏性末端和平末端。

 

　　2.“分子縫合針”——DNA連接酶

 

　　(1)作用：將兩個具有相同粘性末端的DNA片段連接起來，形成重組DNA

 

　?。?）連接的化學鍵：磷酸二酯鍵

 

　?。?）與DNA聚合酶作用的異同:

 

　　DNA聚合酶只能將單個核苷酸加到已有的核苷酸片段的末端，形成磷酸二酯鍵。

 

　　DNA連接酶是連接兩個DNA片段的末端，形成磷酸二酯鍵。

 

　　3.“分子運輸車”——運載體

 

　?。?）載體具備的條件：

 

　?、倌茉谑荏w細胞中復制并穩(wěn)定保存。

 

　?、诰哂幸恢炼鄠€限制酶切點，供外源DNA片段插入。

 

　?、劬哂袠擞浕颍┲亟MDNA的鑒定和選擇。

 

　?。?）最常用的載體是質粒,它是一種環(huán)狀DNA分子。

 

　?。?）其它載體：噬菌體、動植物病毒

 

　　(二)基因工程的基本操作程序

 

　　第一步：目的基因的獲取

 

　　1.從基因文庫中獲?。ú恢滥康幕虻暮塑账嵝蛄械那闆r下采用）

 

　　2.人工合成。常用方法有：

 

　?。?）反轉錄法（已經(jīng)獲得mRNA的情況下采用）

 

　　（2）化學合成法（知道目的基因的核苷酸序列、基因比較小的情況下采用）

 

　　3.PCR技術擴增目的基因（知道目的基因兩端的核苷酸序列、基因比較大的情況下采用）

 

　?。?）PCR的含義：是一項在生物體外復制特定DNA片段的核酸合成技術。

 

　?。?）目的：獲取大量的目的基因

 

　　（3）原理：DNA雙鏈復制

 

　?。?）過程：

 

　　第①步：變性，加熱至90～95℃DNA解鏈為單鏈；（高溫解旋）

 

　　第②步：復性，冷卻到55～60℃，引物與兩條單鏈DNA結合；

 

　　第③步：延伸，加熱至70～75℃，熱穩(wěn)定DNA聚合酶從引物起始進行互補鏈的合成。

 

　?。?）特點：指數(shù)形式擴增

 

　　第二步：基因表達載體的構建(核心)

 

　　1.目的：使目的基因在受體細胞中穩(wěn)定存在，并且可以遺傳至下一代，使目的基因能夠表達和發(fā)揮作用。

 

　　2.組成：目的基因＋啟動子＋終止子＋標記基因

 

　?。?）啟動子：是一段有特殊結構的DNA片段，位于基因的首端，是RNA聚合酶識別和結合的部位，能驅動基因轉錄mRNA。

 

　　（2）終止子：也是一段有特殊結構的DNA片段 ，位于基因的尾端，使轉錄停止。

 

　?。?）標記基因的作用：鑒定受體細胞中是否含有目的基因，從而將含有目的基因的細胞篩選出來。

 

　　常用的標記基因是抗生素基因。

 

　　第三步：將目的基因導入受體細胞_

 

　　1.轉化的概念：是目的基因進入受體細胞內，并且在受體細胞內維持穩(wěn)定和表達的過程。

 

　　2.常用的轉化方法：

 

　　將目的基因導入植物細胞：采用最多的方法是 農桿菌轉化法，其次還有 基因槍法和 花粉管通道法等。

 

　　將目的基因導入動物細胞：最常用的方法是 顯微注射技術。方法的受體細胞多是 受精卵。

 

　　將目的基因導入微生物細胞：感受態(tài)細胞法：用 Ca2+ 處理細胞

 

　?。ㄊ蛊涑蔀?感受態(tài)細胞 ，再將 重組表達載體DNA分子 溶于緩沖液中與感受態(tài)細胞混合，在一定的溫度下促進感受態(tài)細胞吸收DNA分子，完成轉化過程）

 

　　原核生物作為受體細胞的優(yōu)點： 繁殖快、多為單細胞、遺傳物質相對較少

 

　　第四步：目的基因的檢測和表達

 

　　1.首先要檢測轉基因生物的染色體DNA上是否插入了目的基因，方法是采用DNA分子雜交(DNA-DNA)技術。

 

　　2.其次還要檢測目的基因是否轉錄出mRNA，方法是采用分子雜交(DNA-RNA)技術。

 

　　3.最后檢測目的基因是否翻譯成蛋白質，方法是采用抗原—抗體雜交技術。

 

　　4.有時還需進行個體生物學水平的鑒定。如生物抗蟲或抗病的鑒定等。

 

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　　基因工程的應用

 

　　1.植物基因工程：抗蟲、抗病、抗逆轉基因植物，利用轉基因改良植物的品質。

 

　　2.動物基因工程：提高動物生長速度；改善畜產(chǎn)品品質；用轉基因動物生產(chǎn)藥物：如乳腺生物反應器和膀胱生物反應器，方法是將目的基因導入哺乳動物的受精卵中，使其發(fā)育成轉基因動物。

 

　　3.基因治療是把正常基因導入病人的體內，使該基因的表達產(chǎn)物發(fā)揮功能，從而達到治療的目的，這是治療遺傳病最有效的手段。

 

　　4.基因診斷：又稱為DNA診斷，是采用基因檢測的方法來判斷患者是否出現(xiàn)了基因異?；驍y帶病原體。

 

　　刷題鞏固

 

　　1、下列關于基因工程敘述正確的是（  ）

 

　　A．各種遺傳病的基因異常是不同的，同一遺傳病的基因異常是相同的

 

　　B．一種基因探針能檢測水體中的各種病毒

 

　　C．基因治療就是把缺陷基因誘變成正?；?/p>

 

　　D．基因診斷的基本原理就是DNA分子雜交

 

　　解析：第一步，本題考查生物醫(yī)學知識。

 

　　第二步，基因診斷，又稱DNA診斷或分子診斷，該技術的基本原理是：互補的DNA單鏈能夠在一定條件下結合成雙鏈，即能夠進行DNA分子雜交。

 

　　因此，選擇D選項。